如今生物保鮮已成為國(guó)內(nèi)外科研工作者研究的重點(diǎn),,利用微生物拮抗菌進(jìn)行保鮮。菌種保藏方法有傳代保藏法,、液體石蠟覆蓋保藏,、冷凍干燥保藏、液氮超低溫保藏,、蒸餾水保藏等菌種保藏方法,他們各有各的優(yōu)點(diǎn),,具體使用哪個(gè)方法,要針對(duì)不同的拮抗菌的特點(diǎn)及保藏目的需要,,從而選擇**的保藏方法,。
液氮罐
舉例說(shuō)明:
液氮超低溫保藏法:是菌種長(zhǎng)期保藏的*有效*可靠的方法。液超低溫保藏法是把菌種裝在含有冷凍保護(hù)劑的安瓶瓶?jī)?nèi),,將該安瓶瓶放人液氮(-196℃)中保藏,。由于菌絲體處于-196℃,其代謝降低到完全停止的狀態(tài),。甘油,、血清蛋白、二甲基亞砜,、聚乙烯氮戊環(huán),、糊精、吐溫80等可用做液氮低溫保藏法的保護(hù)劑,,其中甘油在進(jìn)入和游出細(xì)胞時(shí)速度非常緩慢,,造成強(qiáng)烈的脫水,從而保護(hù)細(xì)胞,,是目前*常用的保護(hù)劑,。不同微生物要選擇不同的保護(hù)劑,再通過(guò)實(shí)驗(yàn)加以確定保護(hù)劑的濃度,,原則上是控制在不足以造成微生物致死的濃度,,一般甘油為10%-20%、二甲基亞砜為5%-10%,、聚乙烯氮戊環(huán)為0.4mmol/L,。
冷凍干燥保藏法:為菌種保藏方法中*有效的方法之一,對(duì)一般生活力強(qiáng)的微生物及其孢子以及無(wú)芽胞菌都適用,。這種方法適用于菌種長(zhǎng)期保存,,一般可保存數(shù)年至十余年。因?yàn)槔鋬龈稍锓ㄊ咕N處于一個(gè)無(wú)氧的真空環(huán)境中,,微生物不能進(jìn)行正常的新陳代謝,,只能處于休眠狀態(tài)。當(dāng)環(huán)境變?yōu)檫m合生長(zhǎng)的適合,才會(huì)繼續(xù)增殖生長(zhǎng),。所以保藏期就比較長(zhǎng),。目前像春雷霉素、頭孢霉素,、卡那霉素等抗生素菌種不易產(chǎn)生孢子的絲狀真菌,,都是采用冷凍干燥法保存的。另外我國(guó)大多數(shù)生物制品菌種都是采用該法保藏,。
液氮罐