如今生物保鮮已成為國內(nèi)外科研工作者研究的重點,,利用微生物拮抗菌進行保鮮,。菌種保藏方法有傳代保藏法,、液體石蠟覆蓋保藏,、冷凍干燥保藏,、液氮超低溫保藏,、蒸餾水保藏等菌種保藏方法,他們各有各的優(yōu)點,,具體使用哪個方法,,要針對不同的拮抗菌的特點及保藏目的需要,從而選擇**的保藏方法,。
液氮罐
舉例說明:
液氮超低溫保藏法:是菌種長期保藏的*有效*可靠的方法,。液超低溫保藏法是把菌種裝在含有冷凍保護劑的安瓶瓶內(nèi),將該安瓶瓶放人液氮(-196℃)中保藏,。由于菌絲體處于-196℃,,其代謝降低到完全停止的狀態(tài)。甘油,、血清蛋白,、二甲基亞砜、聚乙烯氮戊環(huán)、糊精,、吐溫80等可用做液氮低溫保藏法的保護劑,,其中甘油在進入和游出細胞時速度非常緩慢,造成強烈的脫水,,從而保護細胞,,是目前*常用的保護劑。不同微生物要選擇不同的保護劑,,再通過實驗加以確定保護劑的濃度,,原則上是控制在不足以造成微生物致死的濃度,一般甘油為10%-20%,、二甲基亞砜為5%-10%,、聚乙烯氮戊環(huán)為0.4mmol/L。
冷凍干燥保藏法:為菌種保藏方法中*有效的方法之一,,對一般生活力強的微生物及其孢子以及無芽胞菌都適用,。這種方法適用于菌種長期保存,一般可保存數(shù)年至十余年,。因為冷凍干燥法使菌種處于一個無氧的真空環(huán)境中,,微生物不能進行正常的新陳代謝,只能處于休眠狀態(tài),。當環(huán)境變?yōu)檫m合生長的適合,,才會繼續(xù)增殖生長。所以保藏期就比較長,。目前像春雷霉素,、頭孢霉素、卡那霉素等抗生素菌種不易產(chǎn)生孢子的絲狀真菌,,都是采用冷凍干燥法保存的,。另外我國大多數(shù)生物制品菌種都是采用該法保藏。
液氮罐