1,、冷凍越慢越好，復(fù)蘇越快越好
氣相液氮罐
細(xì)胞冷凍越慢越好,，細(xì)胞冷凍前,，要有充足的時間;復(fù)蘇是相反的，速度越快越好,。從液氮罐里取出來之后,，迅速放在37℃水浴中，然后使勁搖,，讓它盡快融化,。
2、細(xì)胞凍存和復(fù)蘇注意事項
和液氮接觸時,，要戴保護(hù)眼鏡和手套,。因?yàn)閺?fù)蘇過程中搖晃,，小瓶有可能會爆炸;還有，凍存液中的DMSO是有毒致癌的,。所以接觸的時候一定要帶好手套,。
3、凍存細(xì)胞數(shù)量要足夠
無論再怎么小心,，細(xì)胞在冷凍和復(fù)蘇過程中總會死掉一批的,。所以，一開始凍存細(xì)胞的數(shù)量要足夠,。
4,、做好標(biāo)記
把培養(yǎng)瓶放入提手，末端應(yīng)該扎有小牌,，注明主人的名字,，細(xì)胞名稱和凍存日期。還要在每個凍存管上寫上細(xì)胞名稱,，代數(shù)和凍存日期,。實(shí)驗(yàn)室的液氮罐都是公用的。每個人應(yīng)該有屬于自己的提手,，會為找自己液氮罐省去好多時間,。
5、細(xì)心照料
復(fù)蘇的細(xì)胞非常脆弱,，需要我們的細(xì)心呵護(hù),。一切和細(xì)胞接觸的動作都要輕柔。
6,、DMSO的問題
前面提到了DMSO是一種有毒致癌物質(zhì),。那么，解凍之后,，應(yīng)不應(yīng)該去除凍存液中的DMSO呢?
氣相液氮罐
是不需要去除的,。除了極少數(shù)特別注明的對DMSO敏感的細(xì)胞外，99%的細(xì)胞都不需要去除DMSO,。解凍后的頻繁換液會慢慢去除掉DMSO的,。
7、解凍前后細(xì)胞所用物質(zhì)要相同
因?yàn)槊恳环N細(xì)胞都有自己特定的,，并且已經(jīng)熟悉了的生長環(huán)境,。突然使用不一樣的培養(yǎng)液和血清，會造成細(xì)胞生長不良,，甚至死亡,。
細(xì)胞培養(yǎng)是個費(fèi)力的事情，要經(jīng)常關(guān)注。要時刻注意培養(yǎng)箱里面的細(xì)胞是不是該換液了,。而掌握了有效的凍存和復(fù)蘇的技術(shù),，就可以解決這個問題。
