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液氮罐中的菌種活化方式

時間:2020-03-09 09:38來源: 作者:班德液氮罐 點擊:
菌種活化就是將保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng),, 逐級擴大培養(yǎng)是為了 得到純而壯的培養(yǎng)物,即獲得活力旺盛的,、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物,。菌種發(fā)酵有 一般需要 2-3 代的復壯過程,因為保存時的條件往往和培養(yǎng)時的條件不相同,,所 以要活化,讓菌種逐漸適應培養(yǎng)環(huán)境 要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法,。 目前國際國內常用的 菌種保存方法包括: 定期移植法,、 液體石蠟法、 沙土管法,、 真空冷凍干燥法,、 80℃ 冰箱凍結法、液氮超低溫凍結法,。 對于不同的保存方式活化的方式也不同: 1 定期移植法的菌種復蘇較簡單,,直接轉接即可; 2 液體石蠟法保存的菌種在復蘇時,挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,, 生長繁殖后,再重新轉接一次; 3 沙土管法保存菌種在復蘇時,,在無菌條件下打開沙土管,取部分沙土粒于適 宜的斜面培養(yǎng)基上,, 長出菌落后再轉接一次,。 或取沙土粒于適宜的液體培養(yǎng)基中, 增殖培養(yǎng)后再轉接斜面; 4 真空冷凍干燥法保存菌種在復蘇時先用 70%酒精棉花擦拭安瓿上部,,將安瓿 管頂部燒熱,, 用無菌棉簽沾冷水,在頂部擦一圈,,頂部出現(xiàn)裂紋,,用挫刀或鑷 子頸部輕叩一下,敲下已開裂的安瓿管的頂端,,用無菌水或培養(yǎng)液溶解菌塊,,使 用無菌吸管移入新鮮培養(yǎng)基上,,進行適溫培養(yǎng); 5 -80℃ 冰箱凍結法保存菌種復蘇時,,從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管,,應 立即放置 38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當快速搖動,。直到內部結冰全部溶解為 止,,約需 50 秒-100 秒,。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內容物移至適宜的培養(yǎng)基 上進行培養(yǎng) 6 液氮超低溫凍結法保存菌種復蘇與-80℃ 冰箱凍結法保存菌種復蘇相似,,從 液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置在 38℃-40℃水浴中快速復蘇并 適當搖動,。直到內部結冰全部溶解為止,,一般約需 50 秒-100 秒。開啟安瓿管或 塑料凍存管,,將內容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng),。 總結一下菌種活化需要以下幾個步驟: **配置菌種適宜生長的培養(yǎng)基 第二將菌種從保藏狀態(tài)恢復到室溫狀態(tài),比如將冷凍的菌種解凍 第三將通過操作將保藏的菌種接種到培養(yǎng)基中培養(yǎng),,此步驟稱為菌種復壯 第四步挑選培養(yǎng)基茁壯的菌落,,挑選其中部分菌落接種到新的培養(yǎng)基中培養(yǎng),重 復此步驟 2-3 次,,從而得到生長良好的菌落 經過這四個步驟就到達將菌種從保藏狀態(tài)活化的目的 液氮罐

  有同學已經說的很專業(yè)了,,我就給你說些簡單實用的。不知道你出于何種目的要 進行活化,。 如果你是用凍存管保存的菌株進行活化,, 取出 2 顆小珠放在適宜的固 體培養(yǎng)基上,合上蓋讓小珠在平皿上滾動,,適宜條件培養(yǎng)就可以了,。長出一個菌 落,你再繁殖就可以了,。如果你是凍干粉的菌種,,準備適宜的液體培養(yǎng)基,少少 一點點粉末接種就可以了,,根據(jù)此菌種一般液體培養(yǎng)所需時間,,大概在 36-48h,, 你還可以在觀察到液體渾濁、試管底部有沉淀時(沉淀者也可能為原本死亡的細 菌),,取 100 微升液體涂抹在固體培養(yǎng)基上。 一般的話,,復蘇的菌種需要重復幾次復壯,。液氮罐
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