怎么在液氮罐里儲(chǔ)存細(xì)胞呢?凍存細(xì)胞的步驟會(huì)影響到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力,,所以在使用液氮罐儲(chǔ)存細(xì)胞時(shí)應(yīng)小心并按步驟操作:
自增壓液氮罐
1,、預(yù)先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存預(yù)冷;
2,、用胰酶對細(xì)胞進(jìn)行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,,PBS沖洗兩次,,用胰酶消化細(xì)胞(盡可能溫和);
3,、再次用完全培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,將預(yù)冷的凍存液加入消化完全的細(xì)胞中,,用滴管輕輕吹打混勻,。
4、在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液,,密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞名稱和凍存日期,。
5、凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力,,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,,放入液氮罐最好;或者可以在4℃;
自增壓液氮罐