如今生物保鮮已成為國(guó)內(nèi)外科研工作者研究的重點(diǎn),,利用微生物拮抗菌進(jìn)行保鮮。菌種保藏方法有傳代保藏法,、液體石蠟覆蓋保藏,、冷凍干燥保藏,、液氮超低溫保藏、蒸餾水保藏等菌種保藏方法,他們各有各的優(yōu)點(diǎn),,具體使用哪個(gè)方法,,要針對(duì)不同的拮抗菌的特點(diǎn)及保藏目的需要,從而選擇最好的保藏方法,。
氣相液氮罐
舉例說明:
液氮超低溫保藏法:是菌種長(zhǎng)期保藏的最有效最可靠的方法,。液超低溫保藏法是把菌種裝在含有冷凍保護(hù)劑的安瓶瓶?jī)?nèi),將該安瓶瓶放人液氮(-196℃)中保藏,。由于菌絲體處于-196℃,,其代謝降低到完全停止的狀態(tài)。甘油,、血清蛋白,、二甲基亞砜,、聚乙烯氮戊環(huán)、糊精,、吐溫80等可用做液氮低溫保藏法的保護(hù)劑,,其中甘油在進(jìn)入和游出細(xì)胞時(shí)速度非常緩慢,造成強(qiáng)烈的脫水,,是目前最常用的保護(hù)劑,。不同微生物要選擇不同的保護(hù)劑,再通過實(shí)驗(yàn)加以確定保護(hù)劑的濃度,,一般甘油為10%-20%,、二甲基亞砜為5%-10%、聚乙烯氮戊環(huán)為0.4mmol/L,。
冷凍干燥保藏法:為菌種保藏方法中最有效的方法之一,。這種方法適用于菌種長(zhǎng)期保存,一般可保存數(shù)年至十余年,。因?yàn)槔鋬龈稍锓ㄊ咕N處于一個(gè)無氧的真空環(huán)境中,,微生物不能進(jìn)行正常的新陳代謝,只能處于休眠狀態(tài),。當(dāng)環(huán)境變?yōu)檫m合生長(zhǎng)的適合,,才會(huì)繼續(xù)增殖生長(zhǎng)。所以保藏期就比較長(zhǎng),。目前像春雷霉素,、頭孢霉素、卡那霉素等抗生素菌種不易產(chǎn)生孢子的絲狀真菌,,都是采用冷凍干燥法保存的,。另外我國(guó)大多數(shù)生物制品菌種都是采用該法保藏。
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