怎么在液氮罐里儲存細(xì)胞呢?一般來講,,凍存細(xì)胞的步驟會影響到細(xì)胞復(fù)蘇時的活力,所以在使用液氮罐儲存細(xì)胞時應(yīng)小心并按步驟操作,,以下 整理的資料,僅供參考,。
1,、預(yù)先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存預(yù)冷;
氣相液氮罐
2,、用胰酶對細(xì)胞進行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細(xì)胞(盡可能溫和);
3,、再次用完全培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,,將預(yù)冷的凍存液加入消化完全的細(xì)胞中,用滴管輕輕吹打混勻,。
4,、在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液,,密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞名稱和凍存日期,。
5、凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時的活力,,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,,放入液氮罐)**;或者可以在4℃,2h;
再總結(jié)一句,,一般細(xì)胞在-80℃存放半年左右,,在液氮里可以放置更長時間。
氣相液氮罐