牛冷凍精液的保存及使用
精液冷凍保存是將精液進(jìn)行特殊處理,保存在超低溫下,,以達(dá)到長期保存的目的,。通常采用液氮(—196℃)和干冰(—79℃)保存。其**優(yōu)點(diǎn)是可長期保存,,使用不受時(shí)間,、地域以及種用雄性動(dòng)物壽命的限制??沙浞痔岣吖5睦寐省,,F(xiàn)將冷凍精液保存起來和怎樣進(jìn)行解凍及給母牛輸精的有關(guān)技術(shù)操作介紹如下,供參考,。
自增壓液氮罐
一,、稀釋液的配方:
12%的蔗糖液75毫升、甘油5毫升,、卵黃液20毫升,。
二、稀釋方法:
將經(jīng)過檢查合格的精液(活力0•6以上,、精子密度中等)按1:2—5倍稀釋液進(jìn)行稀釋,,其稀釋原則應(yīng)保證每個(gè)顆粒精液中所含精子數(shù)不少于3000—4000萬個(gè),解凍后呈直線前進(jìn)運(yùn)行的精子不少于1500萬個(gè),。
三,、冷凍:
在裝有液氮的容器上置一銅紗網(wǎng),距液氮面2厘米左右,,使溫度維持在—80℃至—100℃,。將平衡后的精液用滴管按一定量(0•1毫升)滴于銅紗網(wǎng)、滴完最后一滴停3—5分鐘后,,當(dāng)精液顆粒顏色變白時(shí),,立即浸入液氮,并將全部顆粒取下,,收集于貯精瓶或紗網(wǎng)布袋內(nèi),,并做好標(biāo)記,然后立即移入液氮罐中貯存,。
四,、解凍:
將預(yù)先配制好的2•9%檸檬酸的溶液1毫升,,放入干凈的小試管中,再置于40℃左右的溫水杯中,,迅速取顆粒冷凍精液1粒放入試管,。輕輕搖動(dòng)至化凍時(shí),從水杯中取出試管,,接著檢查精液活力,,不低于0•3即為合格品。
五,、重視保精,、快速解凍與鏡檢
1,、根據(jù)液氮罐的性能要求,,定期添加液氮罐內(nèi)盛裝凍精的提筒不能露在液氮面外。
2,、取精時(shí),,盡可能用長鑷子,切勿將提筒或紗布袋提到臨界線以上處(罐頂10厘米左右),。
3,、從液氮中取出細(xì)管凍精時(shí),要輕輕甩1—2下,,將塑料細(xì)管的棉塞端放入35—40℃的溫水中,,把封口端留在水外1—1•3厘米外,待管內(nèi)精液融化一半時(shí),,立即取出備用,。
4、解凍后的精液鏡檢時(shí),,精子的活力不低于0•3方可用于輸精,,才能確保正常受精。
自增壓液氮罐
5,、解凍后的精液應(yīng)立即輸配,,不宜停放時(shí)間過長,應(yīng)做到現(xiàn)解凍,、現(xiàn)輸精,。
六、適時(shí)輸精
母牛正常排卵是在發(fā)情結(jié)束后6—12小時(shí),,精子在母牛生殖道的存活時(shí)間為12—20小時(shí),,且還需要4—6小時(shí)的獲能過程,才能與卵子結(jié)合受精,。精子15分鐘就會(huì)到達(dá)輸卵管受精部位,,因此,,讓精子早于卵子到達(dá)輸卵管受精部位是提高受胎率的先決條件。
1,、適宜的輸精時(shí)間:是在母牛的發(fā)情后期,。此時(shí)母牛表現(xiàn):精神平穩(wěn),******部腫脹消失,,****不再流出透明液體,。直腸檢查卵泡脹大,表面緊張,,有一觸即破之感,。此時(shí)為**輸精時(shí)機(jī)。
2,、適宜的輸精部位:是在子宮頸內(nèi)口1厘米處即子宮體基部,,過淺易導(dǎo)致精液外流,過深易損傷子宮內(nèi)粘膜,。
3,、適宜的輸精方法:直腸把握子宮頸輸精法。將母牛保定,,左手插入母牛直腸輕輕握住子宮頸后端,,右手將輸精器自陰門向斜上方緩慢插入5—10厘米(以避開尿道口)再改為平插送到子宮頸口,緩慢越過子宮頸管中的皺壁,,到達(dá)子宮頸基部,,徐徐注入精液后,緩緩抽出輸精器,。
自增壓液氮罐
4,、適宜的輸精次數(shù):以1—2次為宜??稍诎l(fā)情母牛發(fā)情高潮后,,黃牛在發(fā)情高潮后6—12小時(shí),水牛在發(fā)情高潮后18—20小時(shí)進(jìn)行**次輸精,,前后間隔8—12小時(shí)再進(jìn)行第二次輸精,。