精液經(jīng)檢查合格后,尚需經(jīng)過稀釋、分裝、保存和運輸?shù)冗^程,最后用于輸精,。精液稀釋是在精液里加一些配制好的,、適宜于精子存活的并保持精子受精能力的溶液,。早期的人工授精,,精液稀釋的目的是單純?yōu)榱嗽黾泳旱娜萘?,以便為更多的母豬輸精,從而提高公畜的配種效能?,F(xiàn)代的人工授精,,精液稀釋不僅要增加精液的容量,還能使精液短期甚至較長期地保存起來,、繼續(xù)使用,,便于長途運輸,從而大大提高優(yōu)秀公豬繁殖率,。因為一頭公豬每次射精所獲得的精子數(shù)遠遠大于授精所要求的精子數(shù),,大約多15-30倍。 (1)稀釋液的成分 一般精液稀釋液包括有一種或多種保護劑,,盡管目前采用的精液稀釋液配方多種多樣,,但就其化學(xué)組成上來看主要有以下一些成分:
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營養(yǎng)劑:減少精子自身能量消耗,以便延長精子壽命,,一般為糖類,,如葡萄糖、果糖,。
稀釋劑;主要擴大精液容量,。因此這類物質(zhì)的劑量,必須與精液具有相同的滲透壓,,一般采用等滲的氯化鈉,、葡萄糖、果,、蔗糖以及某些鹽類溶液,。
保護劑:為降低精液中的電解質(zhì)濃度起緩沖作用,一般用于緩沖的物質(zhì)有檸檬酸鈉,、磷酸氫二鈉,、磷酸二氫鉀等。
抗生素:以阻止細菌生長,,常用抗生素有青霉素,、鏈霉素、慶大霉素,、林肯霉素等
(2)稀釋液的配制 豬精液常溫保存常用的稀釋液種類很多如EDTA,、GuelPh、BTS,、Zorpva,、Reading等,。
可以根據(jù)保存期的長短要求選擇配方,配制時各種成分稱量務(wù)必要準(zhǔn)確,,如果不能保證稱量準(zhǔn)確,,**采用配制好的商品稀釋液粉。
由于稀釋液在溶解后1小時內(nèi)其pH出現(xiàn)明顯的波動,,到約1小時后才達到平衡,。pH的變化可能對精子造成不利。 (3)精液的稀釋和稀釋倍數(shù) 在公豬的一次射精的精液中,,包含的精于數(shù)遠遠多于一頭母豬受精所需的數(shù)量,。因而,可將精液稀釋多倍,,供多頭母豬輸精用,,如果已測得精密度,那么可按比例稀釋,,要求稀釋后每毫升稀釋精液含1億個精于為原則進行稀釋,。如果密度沒有測定,稀釋倍數(shù)一般以2—4倍為宜,。
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加入精液稀釋液應(yīng)在精液采出后盡快進行,,因為新鮮精液不經(jīng)稀釋不利于精子存活,特別是當(dāng)室溫較低時,,精子容易受到低溫刺激,,甚至出現(xiàn)溫度性休克。所以在采出精液后,,應(yīng)注意保溫,,使集精瓶的溫度在采精后維持在30℃左右,精液與稀釋液的溫度必須調(diào)整到一致,,一般是將精液與稀釋液置于同一溫度(30℃)中,,溫度相同后即可進行稀釋,。方法是將一定量的稀釋液沿杯壁緩慢倒入精液杯中,,輕輕搖勻,如果稀釋倍數(shù)大,,先進行低倍稀釋,,防止精子所處的環(huán)境的突然改變,造成稀釋打擊,?!?4)精液的保存 稀釋后即進行保存。豬目前大都采用常溫液態(tài)保存,,**保存溫度為16-18℃,,為保持這一溫度,,夏天應(yīng)將精液保存于常溫冰箱中,冬天則應(yīng)保存于恒溫箱中,。雖然,,常溫保存可將精液保存7天,但在實踐中,,保存精液不應(yīng)超過3天,。在精液存放階段,精子多沉淀在容器的底部,,因此,,通常每天要將容器倒置1-2次,以保證精子均勻地分布在稀釋液中,。
精液常溫保存的原理是利用酸抑制精子的代謝活動,,而不是通過溫度達到這一目的。因為在中性和弱酸性的環(huán)境中,,精子代謝正常,,當(dāng)降低到一定的酸度后,精子的活動受到抑制,,在一定PH范圍內(nèi),,這種抑制是可逆的,當(dāng)pH恢復(fù)到7左右時,,精子可以復(fù)蘇,,如PH繼續(xù)降低,超出此范圍,,則出現(xiàn)不可逆抑制,。研究結(jié)果表明,不同的酸類對精子發(fā)生抑制的pH區(qū)是不相同的,。一般認為,,有機酸較無機酸為好,容易產(chǎn)生抑制,,而且可逆性抑制區(qū)較寬闊,。
總之,在精液稀釋和保存過程中,,以溫度,、PH值、滲透壓等變化最小為好,。
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